公众号网站开发,贵阳花溪建设村镇银行官方网站,西安网站建设制作熊掌号,做销售用什么网站好分子模拟对接和定点突变提高10β–去乙酰巴卡亭-华南农业大学学报华南农业大学学报 2018, 39(5): 87-92Journal of South China Agricultural University doi: 10.7671/j.issn.1001-411X.2018.05.013欧阳萍兰, 黄佳俊, 林淑玲, 等. 分子模拟对接和定点突变提高10β–去乙酰巴卡…分子模拟对接和定点突变提高10β–去乙酰巴卡亭-华南农业大学学报华南农业大学学报 2018, 39(5): 87-92Journal of South China Agricultural University doi: 10.7671/j.issn.1001-411X.2018.05.013欧阳萍兰, 黄佳俊, 林淑玲, 等. 分子模拟对接和定点突变提高10β–去乙酰巴卡亭Ⅲ乙酰氧基转移酶的活力[J]. 华南农业大学学报, 2018, 39(5): 87-92.分子模拟对接和定点突变提高10β–去乙酰巴卡亭Ⅲ乙酰氧基转移酶的活力1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1 1欧阳萍兰 黄佳俊 林淑玲 魏 韬 林俊芳 郭丽琼 刘俊峰刘绮倩(1 华南农业大学 食品学院广东 广州 510642 2 广东省微生态制剂工程技术研究中心广东 广州 510640)摘要: 【目的】提高 10β –去乙酰巴卡亭Ⅲ乙酰氧基转移酶(DBAT)活力从而更高效地体外酶促合成巴卡亭Ⅲ。【方法】通过DBAT与其天然底物乙酰CoA 的计算机分子模拟对接选定C165W、N300I、F160C 3个氨基酸残基进行单点定点突变。突变基因经大肠埃希菌重组表达突变重组酶特性经体外酶促反应测定。【结果】3种突变重组酶的相对分子质量为67 000最适反应温度均为32.5 ℃与野生酶DBAT一致DBATF160C 与DBAT 的最适反应C165W N300I C165W F160C N300IpH为7.5略高于DBAT 和DBAT 的最适反应pH(7.0)DBAT 、DBAT 和DBAT 的比活力与DBAT相比分别提高了61.5%、59.6%和19.2%催化效率分别提高了55.4%、35.1%和2.9%3种突变酶的米式常数(Km)和最大反应速率(vmax)均高于DBAT。【结论】疏水突变导致突变酶的比活力相比野生型均有显著提高研究结果为体外高效酶促合成紫杉醇化学半合成的直接前体物巴卡亭Ⅲ奠定了基础。关键词: 10β–去乙酰巴卡亭Ⅲ乙酰氧基转移酶分子模拟对接定点突变比活力酶促反应巴卡亭Ⅲ中图分类号: Q55S18 文献标志码: A 文章编号: 1001-411X(2018)05-0087-06Increase of 10-deacetyl baccatin Ⅲ-10β-O-acetyl transferase activitywith molecular docking simulation and site-directed mutation1,2 1,2 1,2 1,2
